L'hépatite C est une infection du foie causée par le virus Flaviviridae HCV, qui consiste en une ou plusieurs molécules d'ARN. En règle générale, une série de mesures diagnostiques sont prises pour établir l'hépatite C chez un patient. La PCR est une analyse qui confirme avec précision le diagnostic. Souvent, la conclusion est fournie par les médecins lorsque le patient présente déjà les premiers signes de la maladie.
Qu'est-ce que l'hépatite C
Les lésions hépatiques causées par une infection virale transmise par le sang ou par contact sexuel sont appelées en médecine hépatite C. L'agent causal est un virus contenant de l'ARN d'agents infectieux non cellulaires de la famille des Flaviviridae. L'infection peut rester longtemps dans le corps sans se manifester. Par conséquent, uniquement lorsqu'un micro-organisme est détecté à l'aide d'un test sanguin utilisant l'ARN ARN PCR, l'hépatite C (en tant que diagnostic) est considérée comme justifiée.
Flavivirus n'est pas produit dans des cellules isolées cultivées artificiellement. Au cours du processus de reproduction, l'agent infectieux crée des modifications immunologiquement distinctes. Ces facteurs empêchent le corps de donnerréponse protectrice appropriée, et les experts ont du mal à développer un vaccin efficace.
Le virus se transmet par voie parentérale. Pour l'infection, il doit entrer en quantité suffisante directement dans la circulation sanguine.
Quels sont les tests effectués pour l'hépatite C
Les pathologies virales du foie sont diagnostiquées à l'aide de tests de laboratoire. Les études cliniques de l'hépatite C sont réalisées en étudiant des antigènes étrangers et dangereux ou des composés protéiques (anticorps) dans le biomatériau du patient, principalement dans le sang.
- Test immunoenzymatique (ELISA). La méthode est basée sur la détection des anticorps lgM dans le sang. L'immunoglobuline est considérée comme la plus grande et est un pentamère. Il se manifeste par la réponse protectrice primaire des lymphocytes à une substance étrangère inconnue.
- Radioimmunodosage (RIA) - détermination quantitative de l'immunoglobuline lgM à l'aide d'un isotope radioactif marqué de l'iode.
- PCR de l'hépatite C - détermination de l'ARN viral dans le biomatériau (sang). Cette analyse confirme le diagnostic de manière fiable.
Les tests IgG ne sont pas fiables. Sa présence dans le sérum sanguin peut indiquer non seulement la présence d'un flavivirus, mais aussi une autre infection passée qui a le même agent pathogène.
Ce qui détermine l'analyse PCR
La réaction en chaîne par polymérase (PCR) est basée sur l'identification de régions d'ADN spécifiques de certains pathogènes dans des échantillons de matériel de recherche (épithélium, sang). L'analyse permet d'identifier les plus petits organismes pathogènes (virus) en détectant leur ARN ou leur ADN dans du matériel biologique.
Procédure de laboratoire pour la détection des anticorps PCR de l'hépatite C se déroule en 3 étapes:
- Sélectionner. Le biomatériau étudié est purifié des impuretés et l'ADN est obtenu dans la phase mobile de la colonne chromatographique.
- Amplification. L'analyse est effectuée dans le thermocycleur de l'appareil. Il chauffe et refroidit les éprouvettes avec une certaine cyclicité. Pour une étude, jusqu'à 35 cycles sont effectués. Le résultat est un nombre suffisant de fragments d'ADN pour détecter, identifier et évaluer l'agent pathogène.
- Électrophorèse. Les fragments résultants sont placés dans un gel avec différentes saturations d'agarose et une électrophorèse est effectuée. L'électrophérogramme résultant est analysé sur un ordinateur.
Non seulement l'étude PCR standard est utilisée, mais aussi l'analyse PCR en temps réel. C'est un diagnostic en temps réel. La méthode permet une analyse qualitative et quantitative, qui permet d'identifier la formation et la dynamique de la maladie, ainsi que de prescrire un traitement visant à éliminer la cause de l'origine de la pathologie. La PCR en temps réel est également utilisée pour déterminer une culture pure d'agents infectieux (génotypage).
Comment se fait le test de réaction en chaîne par polymérase
Pour le diagnostic, tout liquide biologique humain peut être utilisé. Le biomatériau utilisé pour le dépistage de l'hépatite C est généralement du sang.
L'échantillonnage pour le diagnostic est effectué dans la procédureBureau. Pour prélever du sang, utilisez des tubes à essai jetables avec une substance qui inhibe la coagulation du sang. Les activités axées sur la prévention de la propagation des agents infectieux permettent d'éviter l'entrée d'une autre souche de micro-organismes provenant de l'extérieur.
Le sang pour la PCR de l'hépatite C est prélevé le matin à jeun. L'échantillon est envoyé immédiatement au laboratoire. Il est permis de stocker le biomatériau à une température de +4 à +8 degrés Celsius. Les contenants sont étiquetés et munis d'instructions. Les résultats des tests sont disponibles dans les 48 heures, parfois plus tôt.
Types de PCR
Le domaine d'application de la réaction en chaîne par polymérase est assez large. Les infectieux déterminent par PCR l'hépatite B, les maladies transmises par les insectes suceurs de sang, le SIDA, la tuberculose. En oncologie, grâce à cette méthode, les cellules tumorales sont détectées à un stade précoce.
Il existe environ quatorze types d'analyse. L'utilisation de l'un ou l'autre type dépend de la portée et des résultats finaux des analyses. Certains types de PCR sont indispensables lorsque le résultat est requis dans les 20 minutes.
Pour diagnostiquer l'hépatite C, 3 types de réaction en chaîne par polymérase sont utilisés:
- L'évaluation qualitative peut être soit positive, indiquant la présence d'une infection dans l'organisme, soit négative, indiquant l'absence d'un flavivirus.
- PCR en temps réel (analyse quantitative) - détermine l'ARN quantitatif de l'agent pathogène en UI/ml.
- Le génotypage est une analyse qui révèle le type (génotype) du virus.
Pour identifier et déterminer avec précision la maladie, suivie deles trois types d'études sont utilisés pour prescrire un traitement optimal.
Analyse qualitative de la réaction en chaîne par polymérase
Une analyse est obligatoire pour tous ceux qui ont un test ELISA qui a détecté des anticorps anti-VHC. La PCR qualitative pour l'hépatite C est le test de sensibilité standard. La méthode vise uniquement la détection, aucun comptage ou isolement d'autres substances n'est effectué.
Pour détecter les anticorps, des systèmes de test spéciaux sont utilisés avec un seuil de sensibilité d'au moins 50 UI/ml. Si des anticorps sont détectés, d'autres tests de clarification sont prescrits. Si le résultat est négatif, aucun autre test ne sera effectué.
Dans certains cas, un faux résultat négatif peut être dû à un personnel de laboratoire incompétent ou à des réactifs de mauvaise qualité. Pour les assurances, mieux vaut refaire l'analyse ailleurs.
PCR quantitative
La méthode est utilisée pour étudier directement le nombre de flavivirus dans un cycle de réaction. Pour une mesure précise, des fragments d'ADN utilisés pour l'hybridation ou des amorces marquées par fluorescence sont utilisés. Il existe une option de détection économique utilisant le colorant SYBL Green. Le colorant est coincé dans une petite rainure de l'ADN et devient bleu lorsqu'il est irradié avec un laser.
La concentration est déterminée par l'appareil-amplificateur en équivalent numérique. Les valeurs peuvent varier légèrement d'un laboratoire à l'autre et doivent donc être comparées aux valeurs de référence.
PCR quantitativel'hépatite C aide à choisir la posologie optimale des médicaments et à déterminer la durée du traitement. La fréquence de l'étude dépend du stade de la maladie, du type de génotype et du traitement prescrit.
Détermination du génotype
Le virus de l'hépatite C a une constitution génétique variable. De nombreuses modifications rendent impossible la création d'un vaccin et compliquent également la thérapie. Au total, 11 génotypes et 100 sous-types ont été identifiés et enregistrés. Dans les pays de l'ex-URSS, chez les personnes infectées par l'hépatite C, la PCR détecte principalement les génotypes 1b et 3.
En présence de l'un des génotypes, la cirrhose ou le cancer du foie peuvent gambader. C'est pourquoi il est si important de détecter le virus à temps.
Pour certains patients, certains médicaments conçus pour combattre le VHC sont toxiques. Le génotypage permet de déterminer le type de protéine et de prescrire un médicament efficace.
Dans les résultats des tests de dactylographie, un nombre avec une lettre latine minuscule indique le génotype du virus. Si le VHC est détecté mais pas typé, cela signifie que la personne a un génotype qui n'est pas typique pour une certaine zone géographique.
Résultats d'analyse
Le médecin s'occupe de déchiffrer les résultats. Seules les données de plusieurs études (associées à l'anamnèse et à l'examen) peuvent donner une image globale et réelle des antécédents médicaux.
- Chez une personne en bonne santé, un test de réaction qualitative dans le biomatériau ne détecte rien. Si la valeur "détectée" est indiquée, l'infection est confirmée et le patienta besoin d'un diagnostic plus approfondi suivi d'un traitement.
- La détermination du nombre d'agents infectieux permet d'évaluer la charge virale sur l'organisme. Normalement, la PCR quantitative de l'hépatite C ne détecte pas l'agent pathogène. Un indicateur allant jusqu'à 810 ^ 5 est considéré comme une faible charge et, avec une thérapie appropriée, garantit un résultat favorable. Des valeurs plus élevées nécessitent un examen approfondi et la détermination d'un traitement à long terme, dont personne ne peut garantir le résultat positif.
- Les résultats de génotypage positifs indiquent quel génotype est reconnu. Un résultat négatif indique soit l'absence d'un flavivirus, soit la présence d'un génotype non typique de cette région.
Qu'est-ce qu'un test PCR positif indique
Toute maladie grave nécessite un diagnostic complet. Une PCR positive pour l'hépatite C confirme le diagnostic, mais des prédictions ne peuvent être faites qu'après des études de laboratoire et instrumentales supplémentaires.
La détection d'un virus ne donne pas une image complète de la pathologie. Il est nécessaire d'identifier son type et sa nature, de déterminer comment il affecte le foie et d'autres organes. La détection précoce du VHC a souvent un résultat thérapeutique favorable.
PCR négatif avec ELISA positif
Lorsque vous observez les symptômes caractéristiques des dommages au foie, il y a une forte probabilité que l'infection soit déjà entrée dans le corps. Par conséquent, vous devez contacter un hépatologue ou un spécialiste des maladies infectieuses. Au cours des entretiens, le spécialiste recueillera une anamnèse et prescrira l'examen nécessaire.
Siles résultats des études sur l'hépatite C PCR sont négatifs, et le dosage immunoenzymatique est positif, cela indique la présence d'anticorps contre le flavivirus dans le sang. Cela se produit généralement lorsque l'infection pénètre dans le corps en petite quantité, de sorte que le système immunitaire s'en est sorti tout seul. Mais ces personnes sont toujours considérées comme infectées et doivent être examinées tous les 6 mois. Si, avec de tels résultats de test, une personne se voit refuser un examen médical gratuit, il est préférable de passer un PCR moyennant des frais pour maintenir la santé, et si les résultats sont positifs, contactez un spécialiste pour le diagnostic et le traitement.
Avantages et inconvénients de la méthode
Lors de l'établissement du diagnostic d'hépatite C, la PCR présente plusieurs avantages:
- Détection précoce de l'agent pathogène.
- Définition précise du virus.
- Efficacité des diagnostics.
- Taux d'erreur minimum.
- Haute sensibilité.
Inconvénients de la méthode:
- Coût élevé de l'analyse. Le test nécessite un équipement coûteux, des réactifs et un personnel médical hautement qualifié. Tous ensemble, cela représente un montant considérable.
- Des exigences strictes pour le transport de biomatériaux.
Traitement de l'inflammation du foie
L'analyse PCR pour le virus de l'hépatite C est considérée comme fondamentale pour le diagnostic, mais pas définitive. Pour que la thérapie soit efficace, un certain nombre d'études supplémentaires en laboratoire et instrumentales sont nécessaires. Après avoir tout passémesures diagnostiques le médecin prescrit un traitement:
- Le régime 5 est prescrit.
- L'alcool est complètement exclu.
- Réception conjointe d'interféron et de ribavirine pendant 25 jours.
- Cours d'hépaprotecteurs "Essentielle", "Karsil", "Phosphogliv".
- Dans des cas particuliers, la plasmaphérèse discrète est utilisée.
Les médicaments prescrits par un hépatologue sont utilisés régulièrement, sans modification de la posologie. La durée de prise des médicaments est déterminée par le médecin après avoir passé les tests de contrôle. Après avoir terminé le traitement, vous devez consulter le médecin tous les six mois.
Le diagnostic PCR permet d'identifier l'agent causal de l'hépatite C à un stade précoce. Cela contribue à l'efficacité du traitement et à la prévention de la transition de la maladie vers des formes dangereuses telles que la cirrhose et le carcinome hépatocellulaire.
