Recherche bactériologique : algorithme, méthodologie, objectifs, étapes

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Recherche bactériologique : algorithme, méthodologie, objectifs, étapes
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Qu'est-ce que la recherche bactériologique ? Selon quel schéma est-il réalisé ? Qu'entend-on par sécurité dans ce cas ? Quels sont les objectifs et les étapes de la recherche bactériologique ?

Informations générales

examen bactériologique
examen bactériologique

L'examen bactériologique est un processus scientifique dans lequel les bactéries sont identifiées et leurs propriétés sont étudiées afin de faire un diagnostic microbiologique. La détermination du type ou de l'espèce du micro-organisme résultant (la culture pure est implicite) est d'une grande importance ici. Ceci s'accompagne de l'étude des propriétés biochimiques et physiologiques des organismes, ainsi que de la tendance à la formation de toxines. A ces fins, des réactions de précipitation et d'agglutination sont utilisées. Il est également pratiqué d'infecter des animaux de laboratoire avec détection ultérieure de changements pathologiques.

Travailler avec le matériel de test

algorithme de recherche bactériologique
algorithme de recherche bactériologique

L'algorithme d'étude bactériologique prévoit le strict respect des instructions spéciales. Ainsi, le matériel d'essai doit être recueilli dans des boîtes stériles dans des conditions aseptiques. Il faut aussi s'occuperassurer la livraison au laboratoire dans les meilleurs délais. Le stockage au froid des échantillons est souhaitable. La technique de la recherche bactériologique prévoit de nombreuses situations possibles. Ainsi, le type d'objet, les propriétés du micro-organisme et la nature de la maladie rendent souvent nécessaire l'élaboration d'instructions de travail individuelles. Un grand nombre de méthodes différentes sont utilisées dans le travail. L'une des plus courantes est la bactérioscopie. Mais si les bactéries ne sont pas fixées, une goutte écrasée ou suspendue est utilisée. Il convient de noter que les deux dernières options se caractérisent par un niveau de contagiosité accru.

Bactérioscopie

Dans ce cas, les traits sont utilisés. Pour les créer, vous devez répartir une goutte du liquide étudié sur la surface d'une lame de verre. Zates devrait le sécher. Cela se fait souvent en déplaçant le médicament à travers une flamme obtenue à partir d'un brûleur à gaz. Bien que les composés de fixation puissent être utilisés comme alternative. Pour indiquer que des actions préparatoires ont été réalisées avec cette préparation, celle-ci est colorée. Le but d'une telle manipulation est la précision, ce qui est très important lors d'un examen microscopique et bactériologique. Après tout, si vous réutilisez le médicament à d'autres fins, vous obtenez de la bouillie, avec laquelle il sera très difficile de travailler efficacement.

Pourquoi la bactérioscopie est si populaire

étapes de la recherche bactériologique
étapes de la recherche bactériologique

Notamment en raison de la disponibilité de cette méthode. Si une étude bactériologique d'une préparation fraîche est effectuée, alors pour déterminer l'agent pathogènedes réactions microchimiques ou une coloration sélective de diverses parties structurelles du micro-organisme peuvent être utilisées. Quel est le meilleur? Un résultat plus précis peut être obtenu en travaillant avec une préparation colorée. Dans ce cas, le matériau d'essai est appliqué sur une lame de verre pré-préparée. Et assurez-vous de mince (et si possible même) couche. Après cela, vous devez attendre que le médicament sèche à l'air. Les microorganismes sont ensuite fixés selon l'une des méthodes classiques. Après cela, la préparation refroidie est soumise à une coloration avec une peinture différentielle ou simple. Pour cela, des préparations sèches et natives peuvent être utilisées. Après cela, il reste à diriger les rayons ultraviolets ou bleus courts vers le lieu d'accumulation des organismes, ce qui fait briller tout le microbe ou certaines parties de son corps.

Application pratique de la bactérioscopie

Il est utilisé pour diagnostiquer un certain nombre de maladies infectieuses. Les plus célèbres d'entre elles sont la tuberculose, la gonorrhée et la fièvre récurrente. De plus, ils recourent à la recherche pour étudier l'ensemble du complexe de la microflore d'un organe ou d'un produit. Mais les critiques soulignent souvent le manque de fiabilité et l'inexactitude relatifs de cette méthode.

Cultures et sous-cultures de cultures bactériennes

objectifs de la recherche bactériologique
objectifs de la recherche bactériologique

Réalisez-les à l'aide d'une pipette Pasteur. La réalisation d'examens bactériologiques et cytologiques est souvent difficile à réaliser sans ensemencement et sous-culture pendant le flux de travail. Lorsque vous travaillez avec une pipette Pasteur, sa pointerompre avec des pincettes. L'outil lui-même est ensuite transporté à travers la flamme du brûleur puis laissé refroidir. Soit dit en passant, les milieux nutritifs liquides et solides peuvent être utilisés pour le semis. Le choix est influencé par les objectifs de la recherche bactériologique qui sont poursuivis. Dans le même temps, il est nécessaire de respecter l'algorithme de travail et les précautions de sécurité. Ainsi, lorsque vous travaillez avec un milieu nutritif liquide, il est nécessaire de s'assurer qu'il ne se répand pas et ne mouille pas les bords du liège et des tubes à essai. Lorsque l'étude est réalisée avec du matériel solide, une aiguille spéciale est souvent utilisée pour entrer dans la culture. Lorsque le semis et le réensemencement sont effectués, ils doivent être effectués à proximité de la flamme d'un brûleur à gaz. Pour la pureté de l'expérience, le tube à essai ne doit pas rester ouvert trop longtemps. Quant à l'outil avec culture: vous devez vous assurer qu'il ne touche à rien. Aussi, la technique de recherche bactériologique prévoit de brûler les bords de l'éprouvette avant de la refermer. Un produit fini doit être signé immédiatement après la production pour éviter toute confusion future.

Efficacité de semis

technique d'examen bactériologique
technique d'examen bactériologique

On pense que cette méthode permet d'obtenir des données plus précises et fiables lors du diagnostic bactériologique que la bactérioscopie précédemment envisagée. Dans ce cas, l'algorithme des actions est le suivant:

  1. Au départ, une culture pure est étalée sur la surface du milieu nutritif, qui est versé dans une boîte de Petri.
  2. Le semis initial doit être effectué dans des conditions favorables à l'espècemicro-organismes.
  3. Après un jour ou deux, en présence d'un environnement optimal, toutes les colonies appropriées se déplacent là où elles peuvent se développer au maximum. Cela les libère ainsi de la microflore étrangère.

Le résultat final est une culture de bactéries homogènes qui peuvent être identifiées.

Cultures pures

Mais comment sont-ils fabriqués ? Pour cela, des méthodes biologiques et mécaniques sont utilisées. Dans le premier cas, un rôle important est joué par les milieux nutritifs, où il existe des conditions nécessaires favorables au développement d'une culture particulière. Une approche peut également être utilisée lorsque des animaux de laboratoire sensibles à un type particulier de bactérie sont infectés. Les méthodes mécaniques sont basées sur l'utilisation d'un instrument stérile, avec lequel la culture est placée dans un milieu nutritif situé dans les première, deuxième et troisième boîtes de Petri. Ensuite, il faut attendre que les colonies individuelles se développent, et une culture pure se démarquera déjà d'elles. Les bactéries peuvent également être cultivées dans des thermostats spéciaux, où la température est maintenue à un certain niveau (généralement environ 37 degrés). Dans ce cas, le processus se poursuit pendant environ une journée. Mais, selon le type de micro-organismes, d'autres termes peuvent être établis. La présence de la concentration d'oxygène requise est également importante. Pour ce faire, utilisez différentes méthodes d'aération. Jusqu'à présent, nous avons parlé de la situation dans son ensemble et en général, mais concentrons maintenant notre attention sur le schéma de la recherche bactériologique.

Pratique

schèmerecherche bactériologique
schèmerecherche bactériologique

Un ensemble de méthodes est souvent utilisé pour détecter des micro-organismes pathogènes dans le corps d'un patient ou d'un porteur potentiel. Les matériaux et les méthodes utilisés dépendent des objectifs de l'analyse, ainsi que des conditions de l'environnement dans lequel le travail est effectué. En pratique, le plus souvent, les bactéries sont détectées par des hémocultures prélevées sur une personne ou un animal. Si les lésions locales sont bien définies, les agents pathogènes peuvent être recherchés dans les zones problématiques. Ceci est typique pour des affections telles que la dysenterie, la gonorrhée, la diphtérie et un certain nombre d'affections similaires. Dans les cas particulièrement graves, ce processus est divisé en étapes distinctes d'examen bactériologique (ce qui est typique de la fièvre typhoïde). Chacun d'eux utilise ses propres méthodes, qui visent à trouver la cause de l'infection. Examinons de plus près la situation avec la fièvre typhoïde. Au cours de la première semaine de la maladie, le moyen le plus fiable de diagnostiquer la maladie est l'hémoculture. Sur le second, une étude sérologique est considérée comme telle. Au cours de la troisième semaine, les selles sont examinées. La dernière méthode est considérée comme la vérification des convalescents.

Identification des micro-organismes

Ça commence par le processus de teinture. Ensuite, ils examinent comment la bactérie peut décomposer les glucides, les acides aminés, etc. De plus, ce processus peut être complété par l'étude d'autres propriétés que possède chaque genre ou espèce de micro-organismes. A titre d'exemple, les possibilités de dissolution des érythrocytes de divers animaux, l'effet sur la coagulation du plasma sanguin et la dissolution des caillots doivent être donnés.fibrine et ainsi de suite. Tout cela est les caractéristiques différentielles des représentants individuels du micro-monde. De plus, l'identification sérologique peut être utilisée pour la reconnaissance finale (mais cela concerne généralement les bactéries pathogènes appartenant à la famille intestinale).

Conclusion

examen microscopique et bactériologique
examen microscopique et bactériologique

Il convient de noter qu'un certain nombre de micro-organismes ne peuvent pas être identifiés par les méthodes décrites dans l'article. Dans ce cas, la pratique consistant à infecter des animaux de laboratoire est largement utilisée. Le calcul est effectué sur le fait qu'une toxigénicité ou une pathogénicité caractéristique apparaîtra, ce qui n'est pas observé dans des conditions artificielles. L'infection peut également être utilisée comme méthode d'accumulation de microbes pathogènes. Et déjà lorsque les caractéristiques de la culture étudiée, trouvées dans le processus d'étude des propriétés biologiques, morphologiques, sérologiques et biochimiques, sont comparées, on peut dire que l'on sait à quel type de microbes nous avons affaire. L'identification signifie une indication du genre, de l'espèce et du type de bactérie. Si le micro-organisme à l'étude s'écarte de certaines propriétés de sa caractéristique typique, cela doit être indiqué. Un certain nombre d'experts estiment que dans de tels cas, il sera utile de ré-identifier avec la duplication de toutes les méthodes et techniques utilisées. Parfois, la recherche peut passer au niveau supérieur, ce qui nécessite une approche plus sérieuse (et plus coûteuse). Si des résultats négatifs ont été obtenus, cela indique que la préparationmicro-organismes étaient absents ou ils n'étaient pas viables. Mais pour la précision de la recherche, si un certain nombre de porteurs de bacilles sont suspectés (dysenterie, diphtérie, fièvre typhoïde), des contrôles répétés sont indiqués dans de tels cas. Cela est nécessaire pour que les spécialistes aient une idée précise de ce à quoi ils doivent faire face.

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